中国药品生物制品检定所

       复方珠香胶囊系由牛黄、麝香、鹿茸、珍珠、黄芪等中药经加工而成。本项研究，由中国药品生物制品检定所药理室主任、副研究员袁惠南，主管药师路岐祥、谭德讲、李冠民、王春仁、徐红，按三类新药对复方珠香胶囊进行了以抗肿瘤作用为主的主要药效学研究，同时对该药扶正、增效、减毒等不同方面也进行了研究。其结果如下：

实 验 材 料

1、动物

       选用国家三级无特殊病原体（SPF）小鼠、三级K.M小鼠质量合格证：京动管质字（1994）第079号；三级C57BL/nμ小鼠质量合格证；京动管质字（1994）第078号、三级 BALB/C小鼠质量合格证；京动管字（1994）第081号；体重18~22克，实验用同一性别，由中国药品生物制品检定所标准化动物繁育场供应。

2、药物

       （1）复方珠香胶囊：不含赋形剂的棕色方剂提取物，1克相当于生药3.69克（实验用药剂量按方剂提取物计算），由长春抗癌药物研究所提供，批号940711#。

       （2）顺氨氯铂（CDDP）：批号91014#。济南齐鲁制药厂生产。

       （3）参莲胶囊：吉林省通化生化制药厂生产。

       （4）环磷酰胺（CY）：批号920513#。上海第十一制药厂生产。

       （5）标准溶菌酶：西德 Boehrimger公司生产。

       （6）微球菌：Microcous Lyso- deikticus，菌号77-28。由中国药品生物制品检定所菌种室提供。

       （7）混合幼兔补体：由10日龄幼兔10只采血分离血清，冷冻干燥保存于-30℃冰箱。

3、瘤种

        Lewis肺癌，S180体肉瘤，肝癌H22，艾氏腹水癌（EAC），黑色素瘤B16，均为中国药品生物制品检定所药理室用三级（SPF）鼠传代保存。

4、仪器

       埃尔玛血球计数仪，PC604，经计量认证合格。

方 法 与 结 果

一、复方珠香胶囊抑瘤试验

       根据“新药审批办法”有关规定，按照国内“抗肿瘤药物筛选规程”规定方法，即按1∶3或500万瘤细胞/0.2ml给小鼠皮下或腹腔接种后，24小时开始给药，给药剂量为0.25g/kg、0.5g/kg、1g/kg3个剂量组，相当于人临床用药量的4.2倍、8.3倍、16.6倍，连续口服7天为一疗程，对照组口服同体积溶剂，设CDDP为阳性对照药，用3mg/kg有效剂量，间隔一天ip连续给药4次为一疗程。按平均瘤重或平均活存天数分别计算瘤重抑制率或生命延长期。

1、复方珠香胶囊对 Lewis肺癌的抑瘤作用

       复方珠香胶囊对C57BL/6J（SPF）小鼠肺癌有明显抑瘤作用，实验重复三批，三批结果均表明该药有抑制肿瘤生长的作用。0.25g/kg组的瘤重抑制率3次试验结果分别为46.8%、39.6%和30.1%；0.5g/kg组的瘤重抑制率为55.1%、59.9%和46.9%；1g/kg组的瘤重抑制率为52.6%、46.3%和48.6%。见表1-1与照片（1-1）。与化疗药CDDP比较复方珠香胶囊的抑瘤作用低于CDDP。

2、复方珠香胶囊对S180实体瘤的抑瘤作用

       复方珠香胶囊对K.M.（SPF）鼠的抑瘤作用，实验重复三批，三批结果均表明该药有明显抑瘤作用。0.25g/kg组的瘤重抑制率为52.8%、52.3%和59.9%；0.5g/kg组的瘤重抑制率为54.5%、68.2%和62.7%；1g/kg组的瘤重抑制率为69.1%、63.6%和72.9%。见表1-2与照片（1-2）。与CDDP比较，复方珠香胶囊的抑瘤作用低于CDDP（1g/kg剂量与CDDP的抑瘤作用相当）。

3、复方珠香胶囊对艾氏腹水型（EAC）生命延长率的作用

       复方珠香胶囊对K.M（SPF）小鼠EAC具有延长生命的作用，实验重复三批，三批结果均表明该药有延长生命存活的作用。0.25g/kg组的生命延长期分别为106.3%、84.2%和70.3%；0.5g/kg组的生命延长期为93.0%、73.9%和81.2%；1g/kg组的生命延长期为108.9%、87.3%和100%。见表1-3。与CDDP比较复方珠香胶囊延长生命作用低于CDDP

4、复方珠香胶囊对肝癌H22的延寿作用

复方珠香胶囊对K.M（SPF）小鼠肝癌H22具有一定延长生命活存期的作用。0.25g/kg组的生命延长期三次结果分别为58.8%、47.1%和40.6%；0.5g/kg生命延长期为68.1%、62.6%和37.8%；1g/kg组的生命延长期为47.3%、52.3%和43.3%。见表1-4。与CDDP比较复方珠香胶囊的生命延长作用低于CDDP。

5、复方珠香胶囊对Lewis肺癌的抗转移作用

按上述方法分组给药，第八天切除原发瘤灶，延长存活期到25天，解剖取肺经固定后计数肺转移灶，结果表明，复方珠香胶囊对C57BL/6J（SPF）鼠，有明显抗肺转移作用，抗转移率为37.4%、56.9%和43.7%。见表1-5与照片（1-3）。与CDDP比较，抗转移率低于CDDP

二、复方珠香胶囊扶正实验

1、复方珠香胶囊对肿瘤相伴免疫（TCI）试验的影响

      用生长良好的S180瘤细胞1.5×107/0.2ml，给C57BL/6J和BALB/C两个不同品质雌性（SPF）小鼠，每只左后腿移植免疫，按上述方法分组给药，使小鼠产生免疫反应。在免疫后第五天截肢术切除原发瘤灶，第八天用同种抗原瘤细胞2×107/0.2ml，再次移植攻击，14天后解剖瘤体称重，以瘤细胞生长情况表明免疫反应的强弱。用免疫组作对照与各免疫加给药组比较观察药物的免疫增强作用。结果表明，通过肿瘤免疫处理的C57BL/6J和BALB/C小鼠，能排斥同种肿瘤的第二次攻击，其肿瘤抑制率分别为73.8%和75.0%。复方珠香胶囊各给药组与免疫对照组比较，长瘤鼠减少，平均瘤重降低。C57BL/6J（SPF）鼠低、中、高剂量组的免疫增强抑制率为71.9%、81.3%和75.0%； BALB/C（SPF）鼠低、中、高剂量组的免疫增强抑制率为69.4%、75.0%和44.4%。经统计学处理，提示该药对由T细胞介导的特异性免疫有明显增强效应。见表2-1。与CDDP比较，由于CDDP是一个烷化剂，破坏DNA分子，在杀伤癌细胞同时也破坏T淋巴细胞，导致机体免疫功能低下，所以免疫增强抑制率明显低于复方珠香胶囊。

2、复方珠香胶囊对肿瘤抗血清细胞毒性的影响

      用生长良好的S180细胞1.5×107/0.2ml皮下荷瘤免疫，按上述方法分组给药，第十天采血分离血清，取同种抗原瘤细胞作靶细胞，进行细胞毒试验，用1640液将靶细胞稀释所需浓度，加稀释的抗血清至37℃，CO2培养箱1小时后加混合幼兔补体，设补体对照，1小时后，用活细胞计数法，经固定后，计数200个瘤细胞中所含死细胞数，按公式：

计算细胞毒指数，结果表明，复方珠香胶囊对抗肿瘤特异性抗体的产生（重复两次结果），均有免疫增强作用。0.25g/kg组细胞毒指数为1.34－1.79；0.5g/kg组细胞毒指数为1.40－1.96；1g/kg组细胞毒指数为1.25－1.74。见表2-2。与参莲胶囊比较两药作用相当。

3、复方珠香胶囊对小鼠抗血清溶菌酶含量的影响

      将上述S180荷瘤鼠抗血清，以微球菌为底物制成含菌体的琼脂板，用前在板上打孔，孔径为3mm，孔中加入标准溶菌酶10μl，37℃保温一定时间测量溶菌酶环直径，绘制半对数标准曲线，求出血清溶菌酶含量。结果表明，复方珠香胶囊对活化单核巨噬细胞功能有增强作用。重复两次结果为：0.25g/kg组的溶菌酶含量31.2μg/ml、36.8μg/ml；0.5g/kg组的溶菌酶含量38.4μg/ml、40.8μg/ml。见表2-3。与CDDP比较，由于CDDP的免疫抑制作用，致使溶菌酶含量明显低于复方珠香胶囊。

三、复方珠香胶囊协同增效作用

      复方珠香胶囊对黑色素瘤B16的协同增效作用

      实验用化疗药选烷化剂CDDP，3mg/kg（相当于1/5LD50）ip，间隔一天，连续4次为适当剂量的治疗高剂量；0.6mg/kg（相当1/25LD50）ip，间隔一天，连续4次为适当剂量的治疗低剂量。化疗药加珠香胶囊高、中、低3个剂量，设荷瘤对照组。按上述方法分组给药，用C57BL6J（SPF）鼠进行对比观察，结果表明，CDDP高剂量组瘤重抑制率为68.8%—73.1%，低剂量组瘤重抑制率为34.2%—40.5%，证实CDDP对黑色素瘤B16的抑瘤作用与剂量有关。当珠香胶囊高、中、低3个剂量组与低剂量CDDP联合应用时，瘤重抑制剂率可达60%以上。见表3—1。提示珠香胶囊能协同小剂量CDDP提高疗效，具有协同增效作用。

 四、复方珠香胶囊的减毒作用

      对环磷酰胺中毒小鼠的影响，实验用CY高剂量组为100mg/kg，ip×2d，珠香胶囊高、中两个剂量组，设参莲胶囊为阳性对照药。在ipcy同时口服珠香胶囊连续7天。实验用K.M（SPF）雌性鼠，停药24小时观察各组体重，外周血象和骨髓造血功能变化。结果：

      1、复方珠香胶囊的各给药组对荷瘤鼠体重增长的影响

      实验表明：CY中毒模型组给药后第八天与正常鼠对照，荷瘤鼠组比较，体重增长明显降低。当ip注射CY同时口服珠香胶囊，体重明显高于CY模型组，见表（4—1）。提示珠香胶囊对荷瘤鼠由CY中毒所致体重降低有保护作用。与参莲胶囊比较，由于参莲胶囊含有苦豆碱等生物碱再与CY合用故体重低于CY模型和珠香胶囊。

      2、复方珠香胶囊各给药组对荷瘤鼠外周血象的影响

      实验表明：荷瘤鼠处在抗肿瘤的免疫反应中，对血液系统有明显影响，荷瘤鼠的白细胞总数、RBC、HGB、HCT与正常鼠比较有明显增高。

      当荷瘤鼠ip注射CY使其出现中毒反应，白细胞总数、RBC、HGB、HCT与荷瘤鼠比较明显低于荷瘤鼠组。各给药组加CY与CY组比较，对CY引起的血液中白细胞总数、RBC、HGB、HCT降低都有明显的升高作用，见表4-2。

      3、复方珠香胶囊各给药组对骨髓有核细胞的影响

      抑制骨髓造血功能是CY的主要毒副作用，CY组小鼠骨髓有核细胞数明显低于正常鼠及荷瘤鼠组。各给药组加CY与CY组比较，骨髓有核细胞数明显增髙，见表4-3。表明珠香胶囊对CY引起小鼠骨髓有核细胞的损伤有保护作用。结果表明，珠香胶囊对由CY引起的毒副反应有明显减毒作用，可减轻造血系统白细胞减少、体重下降等毒副作用，该药与化疗药合用将有利于临床治疗肿瘤患者，保证化疗顺利进行，从而提高疗效。

复方珠香胶囊实验结论

        本实验根据“新药审批办法”有关规定，按照国内《抗肿瘤药物筛选规程》规定方法，选择了 Lewis肺瘤，S180实体肉瘤，肝瘤H22，艾氏腹水型（EAC），黑色素瘤B16五个瘤谱，用国家三级无特殊病原体SPF小鼠，设3个剂量组及阳性对照组，对复方珠香胶囊进行了抗肿瘤药效试验，扶正试验，协同增效和减毒试验，结果表明，复方珠香胶囊对 Lewis肺癌、S180实体瘤有明显抑瘤作用，对 Lewis肺癌有明显抗转移作用，对艾氏腹水型（EAC）、肝癌H22有延寿作用，与阳性化疗药顺氨氯铂比较抑瘤作用低于顺氨氯铂。扶正试验表明，复方珠香胶囊对非特异活化单核巨噬细胞功能、特异性抗肿瘤抗体（有细胞毒性的IgM产生）、T细胞介导的抗肿瘤细胞免疫功能均有明显增强作用。肿瘤相伴免疫试验表明，免疫增强抑制肿瘤生长的抑瘤率可达70%以上，与该药在抑瘤试验中的抑瘤作用相当，提示该药是通过增强机体免疫功能实现抗肿瘤作用的。

        复方珠香胶囊与烷化剂化疗药CDDP联合应用具有协同增效作用，对环磷酰胺引起的中毒反应，有明显减毒作用，证明该药与化疗药合用将有利于临床治疗肿瘤患者，保证化疗顺利进行，从而提高疗效。

（该项试验原始记录保存在中国药品生物制品检定所药理室）

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